Grupos de investigación - MEDIOAMBIENTE Y CIENCIAS SOCIALES

Disruptores Endocrinos y Toxicología Ambiental.


Investigador responsable: Mónica Morales Camarzana

Entidad: Universidad Nacional de Educación a Distancia

Investigadores:

  • Estrella Cortés Rubio
  • Raquel Martín Folgar
  • Pedro José Martínez de Paz
  • Estudio de disruptores endocrinos relevantes en salud.
  • Receptores hormonales.
  • Ecotoxicología y cambio climático: estandarización de bioensayos toxicogenómicos en invertebrados.
  • Evaluación del impacto de disruptores endocrinos ambientales en invertebrados bénticos. Identificación de biomarcadores moleculares por medio de tecnologías genómicas.

Título: “Ecotoxicología y cambio climático: estandarización de bioensayos toxicogenómicos en invertebrados” (CTM2015-64913-R)

Entidad financiadora: Ministerio de Economía y Competitividad

Entidades participantes: UNED

Duración desde: 2015 hasta: 2018

  • Martínez-Paz P, Morales M, Sánchez-Argüello P, Morcillo G, Martínez-Guitarte JL (2017). Cadmium in vivo exposure alters stress response and endocrine-related genes in the freshwater snail Physa acuta. New biomarker genes in a new model organism. Environmental Pollution. 220: 1488-1497.
  • Morales M, Martínez-Paz P, Martin R, Planelló R, Urien J, Martínez-Guitarte JL, Morcillo G (2014). Transcriptional changes induced by in vivo exposure to pentachlorophenol (PCP) in Chironomus riparius (Diptera) aquatic larvae. Aquatic Toxicology. 157: 1-9.
  • Raquel Martín-Folgar, José Luis Martínez-Guitarte (2017). Cadmium alters the expression of small heat shock protein genes in the aquatic midge Chironomus riparius. Chemosphere. 169: 85-492.    

Como sistemas experimentales se utilizan un molusco Physa acuta (Gasteropoda) y un artrópodo Chironomus riparius (Insecta).

C. riparius y P. acuta se cultivan en los laboratorios de la UNED. Las condiciones de cultivo son las estándares, manteniendo los animales en acuarios de cristal con temperatura y periodos de luz/oscuridad controlada (20°C, 16/8h). Esto permite una regularidad en el crecimiento, el desarrollo y la duración de las diferentes etapas del ciclo de vida. Las condiciones de cultivo se ajustan a las establecidas en los protocolos publicados como estándar para test toxicológicos.

Se tiene experiencia con diferentes compuestos seleccionados de la lista elaborada por la Comisión Europea (Endocrine Disruption Website). Dichos compuestos cubren un amplio espectro de aplicaciones y tienen diversa naturaleza química.

Respecto al material para la extracción de DNA, RNA y proteínas, así como para las distintas técnicas de estudio y análisis (electroforesis de DNA y proteínas, PCR y RT-PCR, Western Blot, etc.) empleamos distintos kits de varias casas comerciales. Los oligonucleótidos se diseñan a partir de los datos presentes en las bases de datos de secuencias (GenBank, FASTA) tras los análisis bioinformáticos pertinentes. Los análisis de actividad enzimática se realizan con kits comerciales adaptando los procesos de extracción de proteínas a nuestros organismos modelo.

Los estudios de genotoxicidad se realizan mediante el ensayo cometa.

En el laboratorio del Grupo de Biología y Toxicología Ambiental de la Facultad de Ciencias de la UNED se dispone de:

  • Cinco termocicladores: dos Real-Time PCR (BioRad) y tres PCR (Thermo y BioRad).
  • Horno de hibridación (Thermo Hybaid).
  • Centrífuga refrigerada (Jouan).
  • Microcentrífuga (Eppendorf).
  • Microcentrífugas refrigeradas (Hettich Zentrifugen).
  • Sistema de captura de imágenes y documentación digital de geles, con detección de fluorescencia y quimioluminiscencia (Syngene).
  • Espectrofotómetro UV-visible (Eppendorf).
  • Refrigeradores combi (AEG y Liebherr), congelador -25ºC (Liebherr), congelador -80°C (Thermo Forma).
  • Baño termostatizado con agitación (Memmert).
  • Cubetas de electroforesis para proteínas (BioRad) y ácidos nucleicos (Sigma, GE Healthcare).
  • Pequeño aparataje (micropipetas, balanza analítica, autoclave, agitadores, pHmetro, etc.).
  • Lupa binocular (Nikon) y microscopio de fluorescencia (Zeiss) acoplado a cámara digital color (CoolSnap).
  • Microscopio confocal (Nikon) y microscopio electrónico (Hitachi S 2000N).